解鎖納米抗體分析新范式！Phenomenex SEC平臺方法助力高通量分離

更新時(shí)間：2025-10-10

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在生物醫(yī)藥技術(shù)迭代浪潮中，納米抗體憑借 “小而強(qiáng)" 的獨(dú)特優(yōu)勢，已成為抗體藥物、診斷試劑、工業(yè)酶工程等領(lǐng)域的 “明星分子"。與傳統(tǒng)完整抗體（IgG，約 150 kDa）相比，納米抗體的分子特性與功能優(yōu)勢均展現(xiàn)出特殊潛力，其深度技術(shù)價(jià)值值得深入拆解。

從分子結(jié)構(gòu)來看，納米抗體是駱駝科動物（駱駝、羊駝等）或軟骨魚體內(nèi)天然缺失輕鏈的抗體片段，核心功能區(qū)僅為重鏈可變區(qū)（VHH），分子量覆蓋12-15 kDa（經(jīng)典 VHH）至25-35 kDa（多結(jié)構(gòu)域融合型，如 VHH-Fc 融合體、雙特異性 VHH 等）。

這種 “精簡結(jié)構(gòu)" 帶來了多重不可替代的優(yōu)勢：

一

組織穿透性強(qiáng)

納米抗體的體積僅為傳統(tǒng)抗體的 1/10，能穿透血腦屏障、腫瘤間質(zhì)等致密生物屏障，甚至進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)靶向胞內(nèi)抗原，這是傳統(tǒng)抗體難以實(shí)現(xiàn)的突破；

二

穩(wěn)定性碾壓常規(guī)抗體

其框架區(qū)（FR）存在獨(dú)特的二硫鍵和疏水氨基酸殘基，可在-80℃至 60℃溫度范圍內(nèi)保持活性，耐受 pH 2-11 的環(huán)境，且在蛋白酶（如胃蛋白酶、胰蛋白酶）作用下不易降解，極大拓展了口服給藥、局部外用等應(yīng)用場景；

三

功能可塑性高

通過基因工程改造，可構(gòu)建雙 / 多特異性納米抗體（靶向多個(gè)抗原表位）、抗體藥物偶聯(lián)物（ADC）、酶 - 抗體融合蛋白等，還能與熒光素、放射性核素等標(biāo)記物高效結(jié)合，兼顧診斷與治療功能；

四

生產(chǎn)成本優(yōu)勢顯著

可在大腸桿菌、酵母等原核 / 真核系統(tǒng)中高效表達(dá)，表達(dá)量可達(dá)傳統(tǒng)抗體的 3-5 倍，且純化工藝簡單，大幅降低工業(yè)化生產(chǎn)門檻。

然而，納米抗體的研發(fā)與生產(chǎn)中，精準(zhǔn)表征是質(zhì)量控制的核心難題。由于分子量大范圍覆蓋 12-35 kDa，且易形成二聚體、多聚體（尤其是高濃度制備時(shí)），或在儲存過程中發(fā)生降解，需通過可靠的分析技術(shù)評估純度、聚集體含量等關(guān)鍵指標(biāo)。尺寸排阻色譜（SEC）作為分離效率高、重復(fù)性好的分析手段，成為納米抗體表征的 “黃金標(biāo)準(zhǔn)"—— 而 Phenomenex 推出的納米抗體SEC平臺方法，正是針對這一需求的定制化解決方案。

為驗(yàn)證該平臺方法的性能，我們以優(yōu)化后的色譜條件為基礎(chǔ)，對8個(gè)納米抗體樣品進(jìn)行了分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)充分彰顯其平臺化的技術(shù)優(yōu)勢。色譜柱選用Biozen 1.8um dSEC-2（4.6*150mm），這款生物惰性色譜柱具有獨(dú)特的固定相結(jié)構(gòu)，能實(shí)現(xiàn)高分辨率高通量的效果；流動相為200mM PB(k)+250mM KCl (PH6.6)+5% ACN，可有效減少非特異性吸附；流速設(shè)定為0.35mL/min，柱溫控制在30℃。

在8個(gè)納米抗體樣品的分析中（詳見附圖），所有樣品均實(shí)現(xiàn)了有效分離，能有效區(qū)分納米抗體及其可能存在的微量聚集體或降解產(chǎn)物。從峰形參數(shù)來看，多數(shù)樣品的主峰峰形對稱，不對稱度接近1.0，符合高質(zhì)量色譜分析的要求。同時(shí)，每一針的分析時(shí)間都能控制在八分鐘以內(nèi)，精準(zhǔn)匹配高通量篩選的需求。這些結(jié)果表明，使用Biozen dSEC-2搭建的納米抗體SEC平臺方法不僅能精準(zhǔn)定量目標(biāo)納米抗體，還能靈敏地檢測出樣品中的雜質(zhì)，為納米抗體的質(zhì)量控制提供更加高效全面的支持。